每次ELISA试验都需要去做标准曲线,许多刚接触实验的同学在做完ELISA实验后分析数据绘制标准曲线图更是无从下手。上海恒远技术人员为大家详细解释下怎样绘制ELISA标准曲线图: 1.拟和曲线: 输入行: 浓度值, 如0 10 50 100 400输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型"中选择“xy散点图";在“子图表类型"中选择“折线散点图",按“下一步";选择“系列产生在行",按“下一步";数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度; 按下一步,点击完成。可得曲线图。 单击曲线,按右键,选择“添加趋势线",在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。 得到公式和R平方值。也可以用上面说的方法: 双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。 2.计算浓度: 标准曲线为: y = -4E-05x2 + 0.026x R2 = 0.9745 为例,已知OD值,计算浓度。 由于y = -4E-05x2 + 0.026x,所以可以得到: 4E-05x2 -0.026x +y=0 ax2 +bx +y=0 a=4E-05;b= -0.026; x=(-b-(b*b-4ay)(平方根)) /(2*a) 代入a,b,和y值,得 x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004) 在excel里可以用以下公式表示: x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004) 通用公式为:x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
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