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这些常见的酶联免疫实验问题您也在问?

发布时间:2016-09-06   

    在操作酶联免疫试剂盒实验时,有很多技术问题是比较常见且易错的,而就是这些问题困惑不少实验操作员。上海恒远根据技术部的问题处理总结,整理出了几个比较常见的问题,跟着小编一起往下看吧:

一、为什么必须设置复孔? 

  为获得更准确的实验结果,强烈建议标准品及样本进行复孔检测,因为复孔检测可以:计算平均值,确保实验结果更准确;解决实验中误操作造成的跳孔现象;计算CV值,对实验的操作和试剂盒的精密度进行评估。

二、重复性差怎么办?

1.样品数量不一,加样时间长短不一(恒远来解决:重复某一样品时,加样时间尽可能与次接近)。2.酶标仪滤光片不对或输入波长不对(恒远来解决:TMB显色用450/630波长)。3.酶标仪测定重复性差(恒远来解决:校对酶标仪)。

三、为什么标准曲线线性较差 ?

    需要按照推荐方式保存标准品;溶解标准品之前需短暂离心,彻底收集粉末;确保标准品完全溶解和混匀,然后再进行后续的系列稀释步骤,确保每一步都充分混匀且精确移液;显色的恰当终止;选择合适的数学拟合方程绘制标准曲线。

四、为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作?

   温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。 

    今天的资讯内容就到这里了,上海恒远生物为您提供的酶联免疫试剂盒安全可靠,规格有96T和48T两种,主要代理品牌有美国非常知名的BIM、R&D、TSZ,欢迎您的来电咨询。