一、Elisa试剂盒简单介绍:
【产品名称】:大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒
【英文名称】:Rat Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA KIT
【检测种属】:人、大鼠、小鼠等动植物。
【产品用途】:被测样品定性或定量分析
【产品规格】:48T、96T
【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】:2-8℃
【供货期】:1-3天(现货供应)
【产品性状】:液体盒装
【服务X势】:全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测
【样本储存】:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
二、“大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒”特点概述
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置
8.价格X惠,质量保证,X大限度的节省实验经费。
三、“大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒”技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做X孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以X对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
间接法(检测未知抗体)
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做X、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标X二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,X后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以X对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
四、大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒注意事项
1. 由于底物显色剂对光及其敏感,因此要避光保存。
2. 检测吸光度前应将酶标仪打开,将其预热30min以上。
3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。
4. 要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
五、问题解答
灵敏度是什么意思?
根据我司多年来的销售经验,我司了解到客户针对购买Elisa试剂盒时,灵敏度要求非常高。这是为什么呢?为您解析Elisa试剂盒灵敏度。Elisa试剂盒灵敏度高能使产品达到一定的数值,对产品试验有着非常大利益,它能检测到的分析物的X小量,表示检测下限的能力。
相对灵敏度=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%
测定方法及表示方法:灵敏度标准品、质控血清、阳性标本稀释终点、血清盘(pannel)及临床标本阳性率。
灵敏度标准品可以从卫生部临检中心购买,质控血清可以从卫生部临检中心购买,也可以自己配制。因为质控血清不一定是原倍血清,或由于片段、亚型、位点等原因,评定试剂盒的灵敏度都带有一定的片面性。
阳性标本稀释终点的方法常用于不同试剂盒的比较,但也有上述的片面性。阳性pannel有些可以从卫生部临检中心购买,如HBsAg阳性pannel,也可以自己配制。临床标本阳性率,是一种粗略的估计,但对临床很实用。