上海恒远生物科技有限公司
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产品基本参数
【产品名称】：大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒
【产品用途】：被测样品定性定量分析
【产品规格】：96T/48T(两种规格)
【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】：2-8℃
【供货期】：1-3天(现货供应)
【产品性状】：液体盒装
【产品价格】：电议(含税含运费，我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)
【ELISA检测试剂盒种属】：鹿、羊、鸡、鸭、狼、鱼、马、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、兔子、猪、猴等动植物。
【销售X势】：价格行业X势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退
【待检样本】：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
样品采集：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
【产品保质期】：半年(六个月)
一、ELISA试剂盒检测概述
ELISA（酶联接免疫吸附反应分析）是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。
二、技术服务
我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，X控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
三、“大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒”技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做X孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以X对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
间接法(检测未知抗体)
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做X、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标X二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,X后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以X对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
四、大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
五、结果计算：
在半对数坐标纸上绘制标准曲线。标准品的浓度为X轴，相应的OD值为Y轴，用四参数或对数-对数法绘制X合适的标准曲线。浓度与OD值成反比关系，随着标准品浓度的增加，黄色强度就减少，即OD值减少样本浓度可直接从标准曲线上读取。如果样本实验前进行了稀释，则试剂盒X后结果应乘以相应的稀释因子标准曲线为逆向S型曲线。
附：采用全自动酶标仪检测，只需检测前设置好酶标仪的相关参数，如坐标参数（线性，半对数）和计算方式参数（三次回归、四参数或双对数曲线方程），即可直接得到结果。
产品名称存放：收到货后贮存于4℃，强烈建议尽快使用配制的试剂1X缓冲液贮存于4℃，将不用的微孔板放回至密封袋内密封起来，贮存于4℃，已稀释的标准品，生物标记物，抗体和HRP贮存于4℃。
六、大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒订购说明：
1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日X新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因X过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后，将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、电话等以传真、EMail、短信、电话等形式通知我们。
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